参考答案和解析
正确答案:
又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。
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第1题：
热原的去除方法有（）
- A、高温法
- B、凝胶过滤法
- C、吸附法
- D、微孔滤膜过滤法
正确答案:A,B,C,D -
第2题：
凝胶过滤介质的种类主要有哪些？使用凝胶过滤介质时应注意些什么？
正确答案: 凝胶过滤介质的种类主要有：
⑴多糖类骨架的介质
多糖类主要为纤维素、葡聚糖及琼脂糖等。此类介质具有亲水性及与生物大分子的相容性，可允许生物大分子透过而不发生变性。
⑵合成大分子骨架的介质
如聚丙烯酰胺类等。
⑶由天然大分子与合成高聚物构成混合骨架的介质
这种骨架既可增加介质的刚性及抗微生物侵蚀性，又使介质具有与生物大分子的相容性。
使用凝胶过滤介质时主要应注意：
⑴均匀装柱。
⑵避免生物大分子与凝胶产生非特异吸附。
⑶若分离样品中物质的分子量分布较广或成分复杂，应选用分离范围较广的凝胶进行分离。
⑷样品中成分比较简单，应选用分辨率较高的凝胶进行分离。
⑸应根据样品中组分的情况选取分离范围与分子量相近的介质为好。 -
第3题：
影响凝胶过滤色谱分离效果的因素。
正确答案:流速
影响洗脱液流速的因素：洗脱液加在柱上的压力（为保持层析过程中恒定的压力，可使用恒压瓶）；
凝胶交联度；凝胶颗粒大小。
流速过低：样品横向扩散增大，峰变宽，分辨率降低，洗脱时间长流速过高：洗脱峰重叠，柱压增大，分离效果变差线性流速控制在2～10cm/h
加样体积
体积过大：平台洗脱峰或相邻峰重叠
体积过小：目的蛋白收集量少、稀释倍数大、浓度低
样品浓度
进样前，样品应高度浓缩，浓度为10～20mg/ml分组分离&脱盐除杂：适当提高样品浓度分级分离&分析性实验：浓度低
离子强度
可防止蛋白质与蛋白质之间或与凝胶介质之间的相互作用常用盐溶液：20-100mmol/LNaCl浓度过高引起凝胶柱床体积变化 -
第4题：
凝胶过滤操作中，通常上样量越小，分辨率越高。
正确答案:错误 -
第5题：
凝胶过滤色谱又称排阻色谱、（），其分离原理主要是（），根据凝胶的（）和被分离化合物分子的（）而达到分离目的。
正确答案:分子筛色谱；分子筛作用；孔径大小；大小差别 -
第6题：
凝胶过滤层析
正确答案:也叫做分子排阻层析。一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。 -
第7题：
比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。
正确答案:凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术，但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开，具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱，小分子的蛋白质进入凝胶孔内，大分子的蛋白质留在外面，然后用洗脱液洗脱，蛋白质依分子大小被洗脱，然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质，具体操作是将样品装入透析袋，然后利用高压或离心力，迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜，蛋白质留在透析袋内。 -
第8题：
葡萄糖凝胶过滤色谱
正确答案:原理主要是分子筛作用，根据葡萄糖凝胶的孔径和被分离化合物的分子大小而达到分离目的。 -
第9题：
单选题可用于测定寡聚蛋白质的分子量，而（）可用于测定寡聚蛋白质各个亚基的分（）子量。ASDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；核磁共振
B聚丙烯酰胺凝胶电泳；凝胶过滤层析
C凝胶过滤层析；等电聚焦电泳
D凝胶过滤层析；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
正确答案： A解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题比较蛋白质的分离纯化技术中凝胶过滤和超过滤方法的原理。正确答案： 凝胶过滤和超过滤都是蛋白质分离纯化过程中常用的技术，但是其原理和操作都不相同。凝胶过滤是根据蛋白质分子的大小将样品中的各种蛋白质分子分开，具体操作是将样品通过装有一定规格凝胶的凝胶过滤柱，小分子的蛋白质进入凝胶孔内，大分子的蛋白质留在外面，然后用洗脱液洗脱，蛋白质依分子大小被洗脱，然后是小分子的蛋白质。超过滤是利用蛋白质分子不能穿过半透膜的特性除去蛋白质混合物中的小分子物质，具体操作是将样品装入透析袋，然后利用高压或离心力，迫使蛋白质样品中的非蛋白的小.分子溶质通过半透膜，蛋白质留在透析袋内。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述凝胶过滤层析的优缺点。正确答案： 优点：凝胶属于惰性载体，不带电荷，吸附力弱，操作条件比较温和，温度范围广，不需要有机溶剂，分离效果好
缺点：样品被不断稀释，上样量不能太大，否则分辨率变差解析： 暂无解析 -
第12题：
问答题凝胶过滤层析和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同,为什么？正确答案： 凝胶过滤层析中每一个凝胶珠相当于一个分子筛，故小分子所经过的路径长，落在大分子后面；而凝胶电泳中整块胶板相当于一个分子筛，故大分子受到的阻力大而迁移慢，落在小分子后面。解析： 暂无解析 -
第13题：
凝胶过滤的基本原理是什么？
正确答案:根据分子大小这一物理性质进行分离纯化的。分子越大的组分越先流出，分子越小的组分越后流出。 -
第14题：
简述以多孔硅胶作为凝胶过滤介质的优缺点。
正确答案: 多孔硅胶是具有刚性亲水性的填料，具有一定直径的多孔网状结构的球状颗粒。
优点：物理化学稳定性高，耐热耐压，使用寿命长。
缺点：柱效较低、表面具有离子性，对蛋白质有吸附性、不能在强碱性环境中使用。 -
第15题：
凝胶色谱过滤介质的排阻极限是指不能扩散到凝胶颗粒内部的最小分子的（）。
正确答案:相对分子质量 -
第16题：
凝胶过滤层析和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同,为什么？
正确答案:凝胶过滤层析中每一个凝胶珠相当于一个分子筛，故小分子所经过的路径长，落在大分子后面；而凝胶电泳中整块胶板相当于一个分子筛，故大分子受到的阻力大而迁移慢，落在小分子后面。 -
第17题：
凝胶过滤色谱又称排阻色谱、（），其原理主要是（），根据凝胶的（）和被分离化合物分子的（）而达到分离目的。
正确答案:分子筛色谱；分子筛作用；孔径；大小 -
第18题：
凝胶过滤和SDS-PAGE 均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？
正确答案:凝胶过滤时，凝胶颗粒排阻Mr较大的蛋白质，仅允许Mr较小的蛋白质进入颗粒内部，所以Mr较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过，可以用较小体积的洗脱液从层析柱中洗脱出来。而Mr小的蛋白质必须用较大体积的洗脱液才能从层析柱中洗脱出来。SDS- PAGE分离蛋白质时，所有的蛋白质均要从凝胶的网孔中穿过，蛋白质的相对分子质量越小，受到的阻力也越小，移动速度就越快。 -
第19题：
凝胶过滤
正确答案:又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。 -
第20题：
名词解释题凝胶过滤色谱正确答案： 是在水相淋洗体系中，对于水溶性大分子化合物按其分子尺寸大小进行分离的一种液相色谱技术。解析： 暂无解析 -
第21题：
填空题凝胶色谱过滤介质的排阻极限是指不能扩散到凝胶颗粒内部的最小分子的（）。正确答案： 相对分子质量解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题凝胶过滤介质的种类主要有哪些？使用凝胶过滤介质时应注意些什么？正确答案： 凝胶过滤介质的种类主要有：
⑴多糖类骨架的介质
多糖类主要为纤维素、葡聚糖及琼脂糖等。此类介质具有亲水性及与生物大分子的相容性，可允许生物大分子透过而不发生变性。
⑵合成大分子骨架的介质
如聚丙烯酰胺类等。
⑶由天然大分子与合成高聚物构成混合骨架的介质
这种骨架既可增加介质的刚性及抗微生物侵蚀性，又使介质具有与生物大分子的相容性。
使用凝胶过滤介质时主要应注意：
⑴均匀装柱。
⑵避免生物大分子与凝胶产生非特异吸附。
⑶若分离样品中物质的分子量分布较广或成分复杂，应选用分离范围较广的凝胶进行分离。
⑷样品中成分比较简单，应选用分辨率较高的凝胶进行分离。
⑸应根据样品中组分的情况选取分离范围与分子量相近的介质为好。解析： 暂无解析 -
第23题：
问答题凝胶过滤和SDS-PAGE 均是利用凝胶，按照分子大小分离蛋白质的，为什么凝胶过滤时，蛋白质分子越小，洗脱速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白质分子越小，迁移速度越快？正确答案： 凝胶过滤时，凝胶颗粒排阻Mr较大的蛋白质，仅允许Mr较小的蛋白质进入颗粒内部，所以Mr较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过，可以用较小体积的洗脱液从层析柱中洗脱出来。而Mr小的蛋白质必须用较大体积的洗脱液才能从层析柱中洗脱出来。SDS- PAGE分离蛋白质时，所有的蛋白质均要从凝胶的网孔中穿过，蛋白质的相对分子质量越小，受到的阻力也越小，移动速度就越快。解析： 暂无解析 -
第24题：
问答题简述以多孔硅胶作为凝胶过滤介质的优缺点。正确答案： 多孔硅胶是具有刚性亲水性的填料，具有一定直径的多孔网状结构的球状颗粒。
优点：物理化学稳定性高，耐热耐压，使用寿命长。
缺点：柱效较低、表面具有离子性，对蛋白质有吸附性、不能在强碱性环境中使用。解析： 暂无解析