参考答案和解析
正确答案:酵母双杂交技术是利用真核生物转录调控因子的组件式结构特征,因为这些蛋白质往往是由两个以上相互独立的结构域构成,其中DNA结合结构域(BD)和转录激活结构域(AD)是转录因子发挥功能所必需的。单独的BD能与特定基因的启动区结合,但不能激活基因的转录,而由不同转录调控因子的BD和AD所形成的杂合蛋白却能行使激活转录的功能。将拟研究的编码“猎物”蛋白的基因与AD序列结合,编码“诱饵”蛋白的基因与BD序列结合,形成两段融合基因,并在同一菌株内表达,若“诱饵”蛋白与“猎物”蛋白在核内存在相互作用,就可以重新形成完整的有活性的转录因子,从而激活报告基因的转录。因此根据报告基因的表达与否,即可判断“诱饵”蛋白与“猎物”蛋白之间是否有相互作用。酵母双杂交常用于研究新蛋白质的相互作用和发现蛋白质的功能。
更多“酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的?在科学研究中有什么作用?”相关问题
  • 第1题:

    酵母双杂交系统(两个Pr相互作用)的原理是什么?一般由哪几部分组成?


    正确答案: 原理:在这一系统中,与诱饵蛋白融合的DNA-BD(DNA结合域)和与文库猎物蛋白融合的AD(转录激活域)均来自GAL4相应的结构域.将诱饵蛋白与猎物蛋白的编码质粒分别导入同一个GAL4缺失的酵母细胞中,通过两种相互作用蛋白结合形成复合物,可以重建GAL4的活性,转录激活相应的效应基因。
    三个基本组成部分:
    1.编码靶蛋白与DNA结合域融合蛋白的表达质粒.这种靶蛋白在双杂交系统中专称诱饵蛋白;
    2.cDNA质粒表达文库,文库cDNA表达出的蛋白与转录激活域形成融合蛋白,这些蛋白统称为猎物蛋白;
    3.能反映出体内转录因子活性重建的宿主酵母菌及体现出这种活性的报道基因系统。

  • 第2题:

    用来研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验技术是()。

    • A、酵母双杂交技术
    • B、原位杂交技术
    • C、RACE技术
    • D、SAGE技术
    • E、斑点杂交技术

    正确答案:A

  • 第3题:

    什么是科学假说?它有什么特点?在科学发展中有何作用?试举出几个在科学史上有影响的假说。


    正确答案: 科学假说是根据已知的科学事实和科学原理,对未知自然现象及其规律性,作出假定性的说明和推测。假说是自然科学理论的一种重要思维形式。
    特点:(1)科学性。假说以一定的科学事实和已知科学理论为依据,具有科学性特点;
    (2)假定性。以科学问题的形式表现出来的理论困难是提出假说的契机;
    (3)多样性(或易变性)。假说会随着实践过程中的新发现而变化。
    作用:(1)科学假说是通向科学理论的桥梁;
    (2)假说是发展理性思维的“实在因素”;
    (3)各种假说并存,有利于学术繁荣。

  • 第4题:

    简述酵母双杂交系统的优缺点。


    正确答案: 酵母双杂交系统所具有的优点:①蛋白质作为被研究的对象不用被纯化;②检测在活细胞内进行,可以在一定程度上反映体内(细胞内)的真实情况;③由于这一系统可以反映基因表达产物的累积效应,因而可检测存在于蛋白质之间微弱或短暂的相互作用;④采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA文库,可用于分析多种不同功能的蛋白。
    局限性:①双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内,而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等,这些反应在核内无法进行。②由于某些蛋白本身具有激活转录功能或在酵母中表达时发挥转录激活作用,从而引起报告基因的表达,产生“假阳性”结果。③双杂交只是反映蛋白质间能发生作用的可能性,这种可能还必须经过其他实验验证,尤其要与生理功能研究相结合,否则可能会误入歧途。

  • 第5题:

    定点突变技术在酶分子修饰中有什么作用?简述其主要技术过程。


    正确答案:作用:通过定点突变技术或是化学方法,将酶蛋白分子中的某个氨基酸残基置换为另一个氨基酸残基,观察其对酶催化反应的影响和变化,分析了解该氨基酸残基在酶催化过程中的作用。
    技术过程:
    A、基因序列分析
    B、蛋白质结构分析
    C、酶活性中心分析
    D、引物设计进行基因定点突变
    E、酶基因克隆表达
    F、变异特性分析

  • 第6题:

    细菌、霉菌、酵母菌在食品工业中有什么应用。


    正确答案:传统发酵食品、酶制剂细菌、酸奶、食醋、味精、酶制剂、霉菌、酒类、面包、酵母菌、酱油、酱、果胶酶。

  • 第7题:

    问答题
    酵母双杂交系统(两个Pr相互作用)的原理是什么?一般由哪几部分组成?

    正确答案: 原理:在这一系统中,与诱饵蛋白融合的DNA-BD(DNA结合域)和与文库猎物蛋白融合的AD(转录激活域)均来自GAL4相应的结构域.将诱饵蛋白与猎物蛋白的编码质粒分别导入同一个GAL4缺失的酵母细胞中,通过两种相互作用蛋白结合形成复合物,可以重建GAL4的活性,转录激活相应的效应基因。
    三个基本组成部分:
    1.编码靶蛋白与DNA结合域融合蛋白的表达质粒.这种靶蛋白在双杂交系统中专称诱饵蛋白;
    2.cDNA质粒表达文库,文库cDNA表达出的蛋白与转录激活域形成融合蛋白,这些蛋白统称为猎物蛋白;
    3.能反映出体内转录因子活性重建的宿主酵母菌及体现出这种活性的报道基因系统。
    解析: 暂无解析

  • 第8题:

    问答题
    细菌、霉菌、酵母菌在食品工业中有什么应用。

    正确答案: 传统发酵食品、酶制剂细菌、酸奶、食醋、味精、酶制剂、霉菌、酒类、面包、酵母菌、酱油、酱、果胶酶。
    解析: 暂无解析

  • 第9题:

    问答题
    酵母双杂交体系的原理及其用途是什么?

    正确答案: 原理:如同许多真核生物的转录因子一样,酵母β-半乳糖苷酶的转录因子GAL4也含有两个结构上可分开的、功能上相互独立的结构域,即DNA结合域(DNA_BD)和转录激活域(AD)。应用DNA重组技术,可以把GAL4转录因子的这两个结构域分开。如果把它们放置在同一个酵母细胞中,所产生的GAL4DNA-BD和AD多肽,彼此之间不会直接发生相互作用,所以不具有转录因子的功能活性,无法激活相关基因转录,。但是应用DNA重组技术,将两个分开的GAL4的DNA-BD和AD,甚至分别来自两个不同的转录因子的DNA-BD和AD重组成一个转录因子(使之在空间上彼此靠近)则又可重新获得转录因子的功能活性,即可激活相关基因的转录。酵母双杂交体系就是根据这种原理建立的。酵母双杂交体系包括两种大肠杆菌-酵母菌的穿梭载体(DNA-BD质粒载体和AD质粒载体);和一种特殊的己经缺失了内源GAL4转录因子的酵母寄主菌株。
    用途:酵母双杂交体系简称Y2H,是在转录因子结构的基础上发展出来的一种敏感的体内鉴定基因的方法。可用来有效地分离与己知靶蛋白相互作的另一种蛋白质编码基因,也是分离与某种特定启动子调控元件结合的特异性转录因子的有效手段。酵母双杂交体系还可以用于产物未知基因的分离、也可用于新基因功能的鉴定。
    解析: 暂无解析

  • 第10题:

    单选题
    制备单克隆抗体采用的技术是(  )。
    A

    淋巴细胞杂交瘤技术

    B

    酵母双杂交技术

    C

    酵母单杂交技术

    D

    基因定点突变技术


    正确答案: B
    解析:
    单克隆抗体技术是在体细胞融合技术基础上发展起来的。A项,骨髓瘤细胞在体外可以连续传代,而脾细胞是终末细胞,不能在体外繁殖。将小鼠的骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合,则融合细胞既具有肿瘤细胞无限繁殖的特性,又具有淋巴细胞分泌针对该抗原的高特异性的抗体-单克隆抗体,同时也克服了免疫淋巴细胞不能在体外繁殖的缺点,融合的细胞称为淋巴细胞杂交瘤。

  • 第11题:

    问答题
    什么是生物统计?它在畜牧、水产科学研究中有何作用?

    正确答案: (1)生物统计是数理统计的原理和方法在生物科学研究中的应用,是一门应用数学。
    (2)生物统计在畜牧、水产科学研究中的作用主要体现在两个方面:一是提供试验或调查设计的方法,二是提供整理、分析资料的方法。
    解析: 暂无解析

  • 第12题:

    单选题
    用来研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验技术是()。
    A

    酵母双杂交技术

    B

    原位杂交技术

    C

    RACE技术

    D

    SAGE技术

    E

    斑点杂交技术


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第13题:

    目前研究蛋白质间相互作用最常采用的方法是()。

    • A、质谱分析
    • B、二维凝胶电泳
    • C、酵母双杂交技术
    • D、DNase I 足纹分析

    正确答案:C

  • 第14题:

    酵母双杂交系统研究蛋白质相互作用需要分离靶蛋白。


    正确答案:错误

  • 第15题:

    什么是轧制图表?其在轧钢生产中有什么作用?


    正确答案: 利用直线或折线反映轧件在轧制过程中所占用的轧制时间,各道次之间的间隙时间以及轧制一根钢所需要的总延续时间以及轧制过程中轧件交叉轧制情况和轧件在任一时间内所处的位置,称为轧钢机工作图表或轧制图表。
    其作用:
    1)分析轧钢机的工作情况,找出工序间的薄弱环节加以改进,使轧制更趋合理。
    2)准确计算轧制时间,各首次的交叉时间和轧制节奏,用以计算轧机的产量。
    3)计算轧制过程中轧辊所承受的轧制压力和电动机传动轧机所承受的负荷。这些都是验算轧机等设备强度及电机能力的必要数据。

  • 第16题:

    什么是科学实验,它在科学研究中有什么作用?


    正确答案: 科学实验是人们为实现预定目的,在人工控制条件下,通过干预和控制科研对象而观察和探索科研对象有关规律和机制的一种研究方法。科学实验在科学认识活动中的作用具体表现在以下几个方面:
    科学实验可以简化和纯化研究对象,即根据研究的目的选出和突出主要因素,舍弃和排除次要、偶然因素,使需要的属性或关系在简化、纯粹的形态下暴露出来,以形成准确认识。
    科学实验可以强化和激化研究对象,即根据研究的需要可以人为地创造特殊条件,改变事物存在的状态,甚至将其推向极端状态,以便显示其规律。

  • 第17题:

    酵母双杂交系统


    正确答案: 是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域基因和GAL4激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。

  • 第18题:

    简述利用“酵母双杂交系统”可以研究蛋白质间的相互作用中的内容。


    正确答案: 真核生物的转录因子可以分为两部分,Binding Domain和Activated Domain。Binding Domain负责结合在DNA上,Binding Domain负责激活转录。二者都是相互独立的区域,但二者单独都不能有转录活性,必须结合在一起或相互靠近在一起才有活性。
    在研究蛋白质相互作用中,将一种蛋白质的基因连接在Binding Domain上,将另一种蛋白质的基因结合在Binding Domain上,蛋白质基因表达后就与转录因子的两个Domain分别结合,两个蛋白质因相互作用而结合在一起,进而使Binding Domain和Activated Domain相互靠近在一起,从而形成具有转录活性的转录因子。在欲表达的基因区域连上报告基因,通过报告基因的表达与否,就可判断蛋白质之间是否发生了相互作用。

  • 第19题:

    问答题
    酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的?在科学研究中有什么作用?

    正确答案: 酵母双杂交技术是利用真核生物转录调控因子的组件式结构特征,因为这些蛋白质往往是由两个以上相互独立的结构域构成,其中DNA结合结构域(BD)和转录激活结构域(AD)是转录因子发挥功能所必需的。单独的BD能与特定基因的启动区结合,但不能激活基因的转录,而由不同转录调控因子的BD和AD所形成的杂合蛋白却能行使激活转录的功能。将拟研究的编码“猎物”蛋白的基因与AD序列结合,编码“诱饵”蛋白的基因与BD序列结合,形成两段融合基因,并在同一菌株内表达,若“诱饵”蛋白与“猎物”蛋白在核内存在相互作用,就可以重新形成完整的有活性的转录因子,从而激活报告基因的转录。因此根据报告基因的表达与否,即可判断“诱饵”蛋白与“猎物”蛋白之间是否有相互作用。酵母双杂交常用于研究新蛋白质的相互作用和发现蛋白质的功能。
    解析: 暂无解析

  • 第20题:

    单选题
    目前研究蛋白质间相互作用最常采用的方法是()。
    A

    质谱分析

    B

    二维凝胶电泳

    C

    酵母双杂交技术

    D

    DNase I 足纹分析


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第21题:

    问答题
    什么是科学实验,它在科学研究中有什么作用?

    正确答案: 科学实验是人们为实现预定目的,在人工控制条件下,通过干预和控制科研对象而观察和探索科研对象有关规律和机制的一种研究方法。科学实验在科学认识活动中的作用具体表现在以下几个方面:
    科学实验可以简化和纯化研究对象,即根据研究的目的选出和突出主要因素,舍弃和排除次要、偶然因素,使需要的属性或关系在简化、纯粹的形态下暴露出来,以形成准确认识。
    科学实验可以强化和激化研究对象,即根据研究的需要可以人为地创造特殊条件,改变事物存在的状态,甚至将其推向极端状态,以便显示其规律。
    解析: 暂无解析

  • 第22题:

    单选题
    酵母双杂交技术被用来研究()
    A

    哺乳动物功能基因的表型分析

    B

    酵母细胞的功能基因

    C

    蛋白质的相互作用

    D

    基因的表达调控

    E

    核酸-蛋白质的相互作用


    正确答案: B
    解析: 暂无解析

  • 第23题:

    单选题
    可检测基因拷贝数变化的是()
    A

    质谱技术

    B

    双向电泳

    C

    Southernblotting

    D

    RNAi

    E

    酵母双杂交技术


    正确答案: D
    解析: 考点:基因拷贝数分析技术。分析基因拷贝数,实质上就是对基因进行定性和定量分析,常用的技术包括DNA印迹、实时定量PCR技术等。