试述PTT检测基因变异的优缺点。

题目

试述PTT检测基因变异的优缺点。

相似考题

1.细菌的变异分为A、形态变异、菌落变异B、耐药性变异、毒力变异C、基因型变异、菌落变异D、基因型变异、表型变异E、形态变异、结构变异

2.细菌的变异根据基因结构是否发生改变可分为A、结构变异B、耐药性变异C、表型变异D、基因型变异E、菌落变异

3.动物试验常用于检测细菌的A:质粒B:基因变异C:型别D:产毒性E:能量代谢

4.所谓的HBsAg阴性的HBV感染是由于A．C基因发生变异B．Pre-S1基因发生变异C．Pre-S2基因发生变异D．S基因发生变异E．P基因发生变异

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  • 第1题：

    所谓的HBsAg阴性的HBV感染是由于

    A:C基因发生变异
    B:Pre-S1基因发生变异
    C:Pre-S2基因发生变异
    D:S基因发生变异
    E:P基因发生变异

    答案：D
    解析：
    本题要点为HBsAg阴性的HBV感染，S基因发生突变，导致HBsAg多肽氨基酸序列的改变的HBV病毒株感染。

  • 第2题：

    试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。


    正确答案: （一）显微注射法
    （1）利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
    （2）优点：可准确导入外源基因，转化频率高，鱼体内可达20%，不需载体，直接获得纯系，实验时间短。
    （3）缺点：仪器贵重，操作繁琐耗时，一次处理卵很少。
    （二）电穿孔转化法
    （1）利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
    （2）优点：操作简单，同时处理大量受精卵。
    （3）缺点：导入是随机的、无定向的，转移率低。
    （三）精子介导法
    （1）精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
    （2）优点：简便，成本低，便于大量筛选，是近几年转基因动物研究的热点。
    （3）缺点：处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
    （四）基因枪转化法
    （1）又称微弹轰击转化法，以高压气体为动力，利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
    （2）优点：该法简单快速，接触面积大、转化率高，可同时处理多个个体。
    （3）缺点：不稳定，表达方面存在问题。
    （五）病毒（噬菌体）颗粒转导法
    用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞。
    转基因病毒具严格的宿主特异性，且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后，此法对鱼类暂不适应。
    （六）组织注射法
    将外源基因直接向机体组织注射，周围组织能将外源基因纳入，并且注入的外源基因能被整合。

  • 第3题：

    试述点突变（基因背景清楚和未知）的主要检测方法。


    正确答案: 对基因背景清楚或部分清楚的点突变，可以采取直接检测基因点突变的方法，如等位基因特异性寡核苷酸杂交（allele specific oligonucleotide，ASO）、PCR-ELISA、等位基因特异性扩增（allele specific amplification，ASA）、PCR-RFLP、基因芯片技术等进行诊断，例如β地中海贫血，可以使用ASO、PCR-RFLP联合基因芯片技术进行诊断。
    对于一些基因背景未知的点突变，可以采用单链构象多态性（single-strand conformationalpolymorphism，SSCP）、变性梯度凝胶电泳（denaturing graient gel electrophoresis，DEEG）、异源双链分析（heteroduplex analysis，HA）、DNA序列测定、蛋白截短测试（protein truncation test，PTT）等方法，如Hopkins大学医学院的研究人员设计了47 对PCR引物，分段扩增血友病A因子Ⅷ 基因片段，进行DGGE分析，发现多态性片段后再进行DNA序列分析，几乎查清了所有临床轻中度病人的点突变。

  • 第4题：

    水稻的糯性、无籽西瓜、黄圆豌豆×绿皱豌豆→绿圆豌豆，这些变异的来源依次是（）。

    • A、环境改变、染色体变异、基因重组
    • B、染色体变异、基因突变、基因重组
    • C、基因突变、环境改变、基因重组
    • D、基因突变、染色体变异、基因重组

    正确答案:D

  • 第5题：

    试述可用基因检测分析的神经系统疾病及相关基因?


    正确答案:主要有：
    (1)亨廷顿病CAG三联体扩展异常(Huntingtin蛋白编码基因)。
    (2)家族性帕金森病(PD)黑质纹状体多巴胺神经元减少。
    (3)PDl型(PDFTl)PARKl基因突变(编码α-synuclein蛋白)。
    (4)青年型(PTJPD)PARK2基因突变(编码Parkin蛋白)。
    (5)脊髓性肌萎缩1、2、3型(SMA1、2、3)基因SMN突变，编码snR蛋白-RNA剪接。
    (6)脊髓小脑变性Ⅰ型(SCA-I)SCAl基因CAG三联体扩展异常，编码ataxin蛋白。
    (7)2A型进行性肌阵挛性癫痫(EPM2A)EPM2A基因突变，编码laforin蛋白-糖原代谢调节的磷酸酶。
    (8)肝豆状核变性病(Wilsondisease)可能与P类ATP酶基因突变有关。
    (9)肌强直性营养不良(MT)myotonin蛋白激酶3’端CTG重复扩展。
    (10)家族性肌萎缩侧索硬化Cu，Zn-SOD点突变。
    (11)神经纤维瘤病-2型(NF-2)merlin编码基因缺失。
    (12)假肥大性肌营养不良(duchenne，Becker)Dystrophin编码基因突变(缺失、重复)。
    (13)脊髓脑干性肌萎缩(SBMA)雄激素受体基因CAG三核苷酸重复扩展。
    (14)脆性X染色体脑发育迟缓(FXMR)基因中CGG重复扩展，FXMRl蛋白为mRNA“伴娘”(chaperone)蛋白。

  • 第6题：

    在日常维护当中，我们通常使用音频表对PTT信号进行检测。


    正确答案:错误

  • 第7题：

    单选题
    动物试验常用于检测细菌的（）
    A

    质粒

    B

    基因变异

    C

    型别

    D

    产毒性

    E

    能量代谢


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    单选题
    基因治疗中去除变异基因，并用有功能的正常基因取代变异基因的方法被称为（）
    A

    基因修正

    B

    基因替代

    C

    基因增强

    D

    基因抑制


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    单选题
    细菌的变异分为（）。
    A

    形态变异、菌落变异

    B

    耐药性变异、毒力变异

    C

    基因型变异、菌落变异

    D

    基因型变异、表型变异

    E

    形态变异、结构变异


    正确答案： A
    解析： 细菌的变异是指在一定条件下，子代与亲代以及子代与子代之间的生物学性状出现差异。细菌的变异可分为基因型变异与表型变异。基因型变异是细菌的基因结构发生了改变。表型变异是细菌在一定的环境条件影响下产生的变异，其基因结构未改变。

  • 第10题：

    问答题
    试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。

    正确答案： （一）显微注射法
    （1）利用注射仪把外源DNA直接注入动物卵母细胞、受精卵、早期胚胎、胚胎干细胞、或体细胞的转基因方法。
    （2）优点：可准确导入外源基因，转化频率高，鱼体内可达20%，不需载体，直接获得纯系，实验时间短。
    （3）缺点：仪器贵重，操作繁琐耗时，一次处理卵很少。
    （二）电穿孔转化法
    （1）利用高压电脉冲作用，使细胞膜上产生可逆的瞬间通道，从而促进外源DNA的有效导入。电穿孔转化法的效率受电场强度、电脉冲时间和外源DNA浓度等参数的影响。
    （2）优点：操作简单，同时处理大量受精卵。
    （3）缺点：导入是随机的、无定向的，转移率低。
    （三）精子介导法
    （1）精子同外源DNA共浴后再给卵子受精，使外源DNA通过受精过程进入受精卵并整合于受体的基因组中。
    （2）优点：简便，成本低，便于大量筛选，是近几年转基因动物研究的热点。
    （3）缺点：处理后精子的受精能力差异较大、阳性率低、转移不稳定。
    （四）基因枪转化法
    （1）又称微弹轰击转化法，以高压气体为动力，利用高速运行的金属颗粒轰击细胞，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒送入细胞的转化方法。
    （2）优点：该法简单快速，接触面积大、转化率高，可同时处理多个个体。
    （3）缺点：不稳定，表达方面存在问题。
    （五）病毒（噬菌体）颗粒转导法
    用病毒（噬菌体）DNA（或RT-DNA）构建的克隆载体或携带目的基因的克隆体，在体外包装成病毒（噬菌体）颗粒后，感染受体细胞，使其携带的重组DNA进入受体细胞。
    转基因病毒具严格的宿主特异性，且鱼类转基因病毒的分析手段非常落后，此法对鱼类暂不适应。
    （六）组织注射法
    将外源基因直接向机体组织注射，周围组织能将外源基因纳入，并且注入的外源基因能被整合。
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    所谓的HBsAg阴性的HBV感染是由于（）
    A

    C基因发生变异

    B

    Pre-S1基因发生变异

    C

    Pre-S2基因发生变异

    D

    S基因发生变异

    E

    P基因发生变异


    正确答案： B
    解析： 本题要点为HBsAg阴性的HBV感染。S基因发生突变，导致HBsAg多肽氨基酸序列改变的HBV病毒株感染。

  • 第12题：

    单选题
    水稻的糯性、无籽西瓜、黄圆豌豆×绿皱豌豆→绿圆豌豆，这些变异的来源依次是（）。
    A

    环境改变、染色体变异、基因重组

    B

    染色体变异、基因突变、基因重组

    C

    基因突变、环境改变、基因重组

    D

    基因突变、染色体变异、基因重组


    正确答案： A
    解析： 水稻的糯性产生的根本原因是基因突变：无籽西瓜的培育利用的原理是染色体变异；黄圆豌豆×绿皱豌豆→绿圆豌豆利用的原理是基因重组。综上所述，D正确。

  • 第13题：

    基因工程技术引起的生物变异属于（）

    • A、染色体变异
    • B、基因突变
    • C、基因重组
    • D、不可遗传的变异

    正确答案:C

  • 第14题：

    试述外源基因表达产物的检测方法。


    正确答案: （一）特异性mRNA的检测
    Northern杂交，即RNA-DNA杂交分析，是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似，检测目的RNA的存在与否及含量。
    （二）报告基因的酶法检测
    （1）报告基因：其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在；其表达产物便于检测。
    （2）目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因，主要有：β-葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）、氯霉素乙酰转移酶基因（CAT基因）、胸苷激酶基因（cA）、二氢叶酸还原酶基因（DHFR）等。
    （三）免疫学检测
    （1）免疫沉淀法
    （2）酶联免疫吸附法（ELISA）
    ELISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液－液抗原－抗体反应体系不同之处是建立了固－液抗原－抗体反应体系，并采用酶标记。抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性；抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后，结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时，可以催化底物的水解、氧化或还原，从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
    （3）Western印迹法
    （4）固相放射免疫（RIA）法
    RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度，可检测出1pg的靶蛋白。
    （四）表达产物的生物学活性检测
    当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时，可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有：淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。

  • 第15题：

    简述变性高效液相色谱法检测基因变异的优点。


    正确答案: DHPLC突变检测技术与其它方法相比，具有更高的准确性和敏感性。
    （1）DHPLC与各种电泳法的比较SSCP分析片段长度<300 bp，对于人类SNP的检出率为50～95％，尤其容易漏检位于发夹结构中的变异。CSGE检测杂合子的灵敏度与SSCP相当或稍低。而DHPLC对150bp~600bp的DNA片段的突变检出率都可达到100％，且而不需要特殊的样本处理。TGGE/DGGE对于异源双链及同源双链分子的检测灵敏度高出CSGE和SSCP很多。但对于较高温度的融解区域的突变检测，DHPLC的灵敏度要高于TGGE/DGGE。
    （2）DHPLC与DNA测序的比较 对于频率高于20%的变异，直接测序的检出率为80％，DHPLC的检出率可达到100％；基因突变频率低于20%时就很难用测序方法检测到，而DHPLC可从待检样品中检测到占总基因量0.5-5%的突变等位基因，且重现性很好。

  • 第16题：

    21世纪被认为是生物的世纪，目前基因芯片可以在很短时间内观察病变的细胞，并分析出数种由于基因突变而引起的疾病。下列与基因芯片有关的叙述中，不正确的是（）

    • A、利用基因芯片可以进行基因鉴定
    • B、基因芯片可以检测变异基因
    • C、基因芯片可以改造变异基因
    • D、基因芯片技术能识别碱基序列

    正确答案:C

  • 第17题：

    遥控台主/备DTR100发射机在（）的情况下不会发生转换。

    • A、IMC卡检测到告警状态
    • B、IMC卡检测到IMC卡之间数据链接中断
    • C、IMC卡检测到PTT次数超过设定值
    • D、IMC卡检测到PTT超时

    正确答案:D

  • 第18题：

    问答题
    试述点突变（基因背景清楚和未知）的主要检测方法。

    正确答案： 对基因背景清楚或部分清楚的点突变，可以采取直接检测基因点突变的方法，如等位基因特异性寡核苷酸杂交（allele specific oligonucleotide，ASO）、PCR-ELISA、等位基因特异性扩增（allele specific amplification，ASA）、PCR-RFLP、基因芯片技术等进行诊断，例如β地中海贫血，可以使用ASO、PCR-RFLP联合基因芯片技术进行诊断。
    对于一些基因背景未知的点突变，可以采用单链构象多态性（single-strand conformationalpolymorphism，SSCP）、变性梯度凝胶电泳（denaturing graient gel electrophoresis，DEEG）、异源双链分析（heteroduplex analysis，HA）、DNA序列测定、蛋白截短测试（protein truncation test，PTT）等方法，如Hopkins大学医学院的研究人员设计了47 对PCR引物，分段扩增血友病A因子Ⅷ 基因片段，进行DGGE分析，发现多态性片段后再进行DNA序列分析，几乎查清了所有临床轻中度病人的点突变。
    解析： 暂无解析

  • 第19题：

    问答题
    简述变性高效液相色谱法检测基因变异的优点。

    正确答案： DHPLC突变检测技术与其它方法相比，具有更高的准确性和敏感性。
    （1）DHPLC与各种电泳法的比较SSCP分析片段长度<300 bp，对于人类SNP的检出率为50～95％，尤其容易漏检位于发夹结构中的变异。CSGE检测杂合子的灵敏度与SSCP相当或稍低。而DHPLC对150bp~600bp的DNA片段的突变检出率都可达到100％，且而不需要特殊的样本处理。TGGE/DGGE对于异源双链及同源双链分子的检测灵敏度高出CSGE和SSCP很多。但对于较高温度的融解区域的突变检测，DHPLC的灵敏度要高于TGGE/DGGE。
    （2）DHPLC与DNA测序的比较 对于频率高于20%的变异，直接测序的检出率为80％，DHPLC的检出率可达到100％；基因突变频率低于20%时就很难用测序方法检测到，而DHPLC可从待检样品中检测到占总基因量0.5-5%的突变等位基因，且重现性很好。
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    问答题
    试述可用基因检测分析的神经系统疾病及相关基因?

    正确答案： 主要有：
    (1)亨廷顿病CAG三联体扩展异常(Huntingtin蛋白编码基因)。
    (2)家族性帕金森病(PD)黑质纹状体多巴胺神经元减少。
    (3)PDl型(PDFTl)PARKl基因突变(编码α-synuclein蛋白)。
    (4)青年型(PTJPD)PARK2基因突变(编码Parkin蛋白)。
    (5)脊髓性肌萎缩1、2、3型(SMA1、2、3)基因SMN突变，编码snR蛋白-RNA剪接。
    (6)脊髓小脑变性Ⅰ型(SCA-I)SCAl基因CAG三联体扩展异常，编码ataxin蛋白。
    (7)2A型进行性肌阵挛性癫痫(EPM2A)EPM2A基因突变，编码laforin蛋白-糖原代谢调节的磷酸酶。
    (8)肝豆状核变性病(Wilsondisease)可能与P类ATP酶基因突变有关。
    (9)肌强直性营养不良(MT)myotonin蛋白激酶3’端CTG重复扩展。
    (10)家族性肌萎缩侧索硬化Cu，Zn-SOD点突变。
    (11)神经纤维瘤病-2型(NF-2)merlin编码基因缺失。
    (12)假肥大性肌营养不良(duchenne，Becker)Dystrophin编码基因突变(缺失、重复)。
    (13)脊髓脑干性肌萎缩(SBMA)雄激素受体基因CAG三核苷酸重复扩展。
    (14)脆性X染色体脑发育迟缓(FXMR)基因中CGG重复扩展，FXMRl蛋白为mRNA“伴娘”(chaperone)蛋白。
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    高通量测序方法在下面哪种实验中没有应用：（）
    A

    基因表达谱检测

    B

    全基因组变异检测

    C

    基因组甲基化检测

    D

    蛋白质表达检测

    E

    非编码RNA表达检测


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    问答题
    试述植物基因工程中转基因的主要方法，其优缺点是什么？

    正确答案： 植物基因工程主要使用两种方法。
    1、根癌农杆菌法 以T-DNA为载体，装载目的基因，构建的双元表达载体导入根癌农杆菌中，与外植体共转化，使外源基因转入受体植物中
    优点：方法简便，多为单拷贝或少拷贝，转化效率高
    缺点：受外植体， 基因型等影响
    2、基因枪法 利用基因枪将外源DNA转入受体植物中
    优点：转化效率高，可对广泛的植物进行转化
    缺点：转化植物往往多拷贝. 遗传不稳定。
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    问答题
    试述PTT检测基因变异的优缺点。

    正确答案： PTT检测突变的优点：
    ①能检测出只与疾病相关的蛋白截短突变；
    ②可检测出在RNA形成过程中发生的突变（如剪接突变）；
    ③通过只鉴定引起疾病截短突变，PTT分析不会受到基因沉默变异如多态性的妨碍；
    ④截短蛋白分子的长度指明了突变的位置，因此更方便进行测序分析以确定突变。
    PPT检测突变的缺点：
    ①由于PCR扩增效率的影响，对于包含几千个核苷酸序列多个外显子的疾病基因，就需要分成几个1－2kb的片段分别扩增，分别进行PTT检测；
    ②由于微小缺失/插入突变对蛋白产物分子大小影响太小，凝胶不能分辩，因而检测不出编码序列中小的插入或缺失或是错义突变；
    ③引起RNA产量改变或使mRNA不稳定的突变可能被漏检。
    解析： 暂无解析

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