提高酶连接效率的方法（）A、加大酶量20倍B、降低温度C、加大平头末端的底物浓度D、降低平头末端的底物浓度
题目
提高酶连接效率的方法（）
- A、加大酶量20倍
- B、降低温度
- C、加大平头末端的底物浓度
- D、降低平头末端的底物浓度
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第1题：
质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？
正确答案: 目的基因片断与载体由相同的单一限制性核酸内切酶（如EcoRI）消化酶切后，两者的两端均具有相同的粘性末端，称为单酶切点的粘性末端，又称全同源性粘性末端。
高背景：载体经单一限制性核酸内切酶切割后，载体分子易于自我环化，既不利于目的基因的重组连接，大大降低阳性克隆效率，又可使非重组性载体造成高背景。为了防止载体的自我环化，通常用碱性磷酸酶去除载体粘性末端的5P以抑制DNA的自我环化。在连接反应中，具有5’-P，的目的基因DNA片断可有效地与去磷酸化质粒DNA载体通过粘性末端发生互补连接，尽管产生的重组DNA分子于连接点含有两个缺口的开环分子，尽管在转化时其转化效率高于线性低于闭和环，但转化大肠杆菌后，在菌体内其缺口可获得修复。
双向插入：经单一限制核酸内切酶（如EcoRI）切割的目的基因和载体，因二者的性末端是相同的，因此在连接反应中，目的基因可发生双向插入，载体对目的基因表达是有方向的，而目的基因可双向与之相连，这种连接若以克隆目的基因片段为目的没有影响，若以表达为目的，我们就要对插入的片段进行方向鉴定，因目的基因由起始密码子向终止密码子方向表达是定向转录的，一旦启动子与目的基因编码顺序方向相反就不能正确转录目的基因的mRNA。若构建表达DNA重组体选用双酶切切割目的基因和载体，可使目的基因与载体的连接发生定向连接重组，以便定向克隆。 -
第2题：
注浆使用标准的U型卡连接，不用再进行二次保护连接了，还可以提高效率。
正确答案:错误 -
第3题：
请简述提高换热器的传热效率的方法？
正确答案: 增大传热平均温差，增大单位体积的传热面积，增大传热系数。 -
第4题：
简述提高钾利用效率的方法？
正确答案: 1、尽量将作物秸秆还田寄施用草木灰，以保持土壤中钾素平衡和供应作物钾素营养需要；
2、施用有机肥（如人畜粪肥）、种养绿肥（如菊科、十字花科、苋科等富钾绿肥植物）；
3、因地制宜，改变钾肥的施用方法，合理施用化学钾肥和矿物钾肥；
4、加强农田水土保持建设，合理灌溉，提倡测土配方施肥，平衡施肥。 -
第5题：
下列与DNA重组连接相关的说法正确的是（）
- A、不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
- B、同聚尾法连接不仅连接效率高，也易回收插入的片段。
- C、限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性，将有利于重组连接。
- D、Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
- E、平末端连接时，在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
正确答案:A,D,E -
第6题：
试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。
正确答案: 1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。
2、在体系中加一点切载体的酶，只要连接后原来的酶切位点消失。这样可避免载体自连，应该可以大大提高平端连接的效率。
3、足够多的载体和插入片段是最重要的。
4、平端的连接对于离子浓度很敏感
5、尽可能缩小连接反应的体积
6、建议放在四度冰箱连接两天效率更高比14度好 -
第7题：
下列关于DNA连接酶叙述错误的是（）
- A、EcoliDNA连接酶来自大肠杆菌，只能连接粘性末端
- B、T4DNA连接酶来自T4噬菌体，既能连接粘性末端，也能连接平末端
- C、T4DNA连接酶连接平末端和粘性末端效率一样
- D、DNA连接酶是“分子缝合针”
正确答案:C -
第8题：
酶之所以有高的催化效率是因为它可提高反应活化能。
正确答案:错误 -
第9题：
问答题质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？正确答案： 目的基因片断与载体由相同的单一限制性核酸内切酶（如EcoRI）消化酶切后，两者的两端均具有相同的粘性末端，称为单酶切点的粘性末端，又称全同源性粘性末端。
高背景：载体经单一限制性核酸内切酶切割后，载体分子易于自我环化，既不利于目的基因的重组连接，大大降低阳性克隆效率，又可使非重组性载体造成高背景。为了防止载体的自我环化，通常用碱性磷酸酶去除载体粘性末端的5P以抑制DNA的自我环化。在连接反应中，具有5’-P，的目的基因DNA片断可有效地与去磷酸化质粒DNA载体通过粘性末端发生互补连接，尽管产生的重组DNA分子于连接点含有两个缺口的开环分子，尽管在转化时其转化效率高于线性低于闭和环，但转化大肠杆菌后，在菌体内其缺口可获得修复。
双向插入：经单一限制核酸内切酶（如EcoRI）切割的目的基因和载体，因二者的性末端是相同的，因此在连接反应中，目的基因可发生双向插入，载体对目的基因表达是有方向的，而目的基因可双向与之相连，这种连接若以克隆目的基因片段为目的没有影响，若以表达为目的，我们就要对插入的片段进行方向鉴定，因目的基因由起始密码子向终止密码子方向表达是定向转录的，一旦启动子与目的基因编码顺序方向相反就不能正确转录目的基因的mRNA。若构建表达DNA重组体选用双酶切切割目的基因和载体，可使目的基因与载体的连接发生定向连接重组，以便定向克隆。解析： 暂无解析 -
第10题：
问答题简述提高试验效率的方法正确答案： （一）选择患病率高的人群作为受试对象：患病率高，阳性预测值高，诊断出的病人数多，试验效率提高
（二）联合试验：
1、平行（并联）试验
同时进行几种诊断目的相同的诊断试验，只要其中一个试验结果为阳性即判断为阳性。
平行试验提高灵敏度及阴性预测值，减少漏诊率，但却增加了误诊率，降低特异度。
当漏掉一个病人后果严重或再进行筛检费人力物力时，要尽量减少漏诊率，可采用此方法。
2、系列（串联）试验
进行一系列诊断目的相同诊断试验，只有所有试验结果都为阳性时判断为阳性。系列试验可提高特异度和阳性预测值，减少误诊率，但增加漏诊率，降低灵敏度。当误诊造成严重后果时，采用此方法。
3、混合法
根据指标的性质与质量的高低，将指标有并联有串联结合起来使用，以达到最好效果。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述提高钾利用效率的方法？正确答案： 1、尽量将作物秸秆还田寄施用草木灰，以保持土壤中钾素平衡和供应作物钾素营养需要；
2、施用有机肥（如人畜粪肥）、种养绿肥（如菊科、十字花科、苋科等富钾绿肥植物）；
3、因地制宜，改变钾肥的施用方法，合理施用化学钾肥和矿物钾肥；
4、加强农田水土保持建设，合理灌溉，提倡测土配方施肥，平衡施肥。解析： 暂无解析 -
第12题：
填空题平末端连接法（blunt end ligation）的连接效率比黏性末端连接的效率低得多，所以通常在连接反应体系中适量添加促进大分子凝聚的凝聚剂，以提高平末端 DNA连接的效率。常用的凝聚剂是（）。正确答案： PEG8000解析： 暂无解析 -
第13题：
提高酶产量的方法
正确答案:1.育优良的产酶细胞株系
2.加诱导物
3.制阻遏物浓度
4.加表面活性剂
5.加产酶促进剂 -
第14题：
提高会议效率的方法有什么？
正确答案:（1）集中精力（2）压缩内容（3）限定时间（4）改进形式 -
第15题：
修补胸腺嘧啶有数种方法，其中之一是用DNA连接酶、DNA聚合酶等催化进行，试问这些酶按下列哪种顺序发挥作用：（）
- A、DNA连接酶→DNA聚合酶→核酸内切酶
- B、DNA聚合酶→核酸内切酶→DNA连接酶
- C、核酸内切酶→DNA聚合酶→DNA连接酶
- D、核酸内切酶→DNA连接酶→DNA聚合酶
正确答案:C -
第16题：
有关站点的作用，正确的是（）
- A、记录连接情况，控制相应行为
- B、提供网络上效率最好的方法
- C、优化复制
- D、提高验证速度
正确答案:A,B,C,D -
第17题：
下列关于平末端连接的说法正确的是（）
- A、同等条件下连接效率高于粘末端连接的连接效率。
- B、加入凝聚剂PEG8000可促进平末端连接。
- C、平末端连接时反应温度要比粘末端连接温度高。
- D、平末端连接方法的使用仅限于酶切后产生的两个平末端之间的连接。
- E、平末端连接比粘末端连接更易产生自身环化。
正确答案:B -
第18题：
构建载体时，使用双酶切相对于单酶切的优点在于（）
- A、避免载体自身环化
- B、提高连接效率
- C、控制外源基因的插入方向
- D、便于转化后的筛选
- E、便于修改阅读框
正确答案:A,B,C,D -
第19题：
降低酶促反应活化能，提高酶催化效率的重要因素是（）、（）、（）、（）、（）。
正确答案:邻近定向效应、诱导契合、共价催化、酸碱催化、微环境影响 -
第20题：
酶的改性是指通过各种方法（）的技术过程。
- A、改进酶的催化特性
- B、提高酶的催化效率
- C、提高酶的稳定性
正确答案:A -
第21题：
单选题酶的改性是指通过各种方法（）的技术过程。A改进酶的催化特性
B提高酶的催化效率
C提高酶的稳定性
正确答案： B解析： 暂无解析 -
第22题：
填空题降低酶促反应活化能，提高酶催化效率的重要因素是（）、（）、（）、（）、（）。正确答案： 邻近定向效应、诱导契合、共价催化、酸碱催化、微环境影响解析： 暂无解析 -
第23题：
多选题提高水泵运行效率的方法一般包括（）。A提高水泵效率
B提高电机效率
C安装调速装置
D制定合理的调配运行方案
正确答案： D,B解析： 暂无解析