用酚抽提蛋白质时，离心后，为什么蛋白质总是会停留在水相和酚相之间？

题目

用酚抽提蛋白质时，离心后，为什么蛋白质总是会停留在水相和酚相之间？

相似考题

1.酚抽提法可用于基因组DNA的分离纯化，所用试剂分别具有不同的功能，下列说法正确的是 ( )A、SDS为生物阴离子去污剂，主要引起细胞膜的降解并能乳化脂质和蛋白质B、EDTA为二价金属离子螯合剂，可抑制DNase的活性，同时降低细胞膜的稳定性C、蛋白酶K有水解蛋白的作用，可消化DNase和细胞中的蛋白质并裂解细胞D、酚可使蛋白质变性沉淀，也可抑制DNase的活性E、pH8.0的Tris溶液能保证抽提后DNA进入水相，避免滞留在蛋白质层

2.测定某一种组织抽提物的蛋白质含量，用什么方法合适（ ）A.双缩脲法B.凯氏定氮法C.酚试剂法D.紫外分光光度法E.染料结合法

3.用酚/氯仿抽提DNA时，通常要在氯仿或酚/氯仿中加入少许异戊醇，原因是什么？

4.测定某一种组织抽提物的蛋白质含量，用A、双缩脲法B、凯氏定氮法C、酚试剂法D、紫外分光光度法E、染料结合法

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  • 第1题：

    提取DNA时，若用酚除蛋白质，需要用Tris-HCl对酚进行平衡，pH达7.8。


    正确答案:正确

  • 第2题：

    核酸抽提纯化中去除蛋白质的试剂是（）。

    • A、乙醇
    • B、异丙醇
    • C、氯仿
    • D、酚
    • E、酚+氯仿

    正确答案:E

  • 第3题：

    茶叶中含量最高的三类有机物是（），这些也就是茶叶产量构成物质。

    • A、糖类、多酚类和脂类
    • B、蛋白质、糖类和多酚类
    • C、多酚类、生物碱和氨基酸
    • D、蛋白质、多酚类和芳香物质

    正确答案:B

  • 第4题：

    抽提塔内溶剂和油混合生成两液相－相为（），另一组为（）。


    正确答案:溶剂；非芳烃

  • 第5题：

    气相色谱法测定水中五氯酚时，萃取地表水中的五氯酚用（）。

    • A、氯仿
    • B、苯
    • C、正乙烷
    • D、石油醚

    正确答案:C

  • 第6题：

    测定某一种组织抽提物的蛋白质含量，用什么方法合适（）

    • A、凯氏定氮法
    • B、双缩脲法
    • C、酚试剂法
    • D、紫外分光光度法
    • E、染料结合法

    正确答案:C

  • 第7题：

    单选题
    关于温度对双水相萃取的影响，下列说法正确的是（）
    A

    在临界点附近，对蛋白质分配系数影响较小

    B

    远离临界点时，对蛋白质分配系数影响较大

    C

    影响双水相黏度和密度，从而影响蛋白质的分配系数

    D

    大规模的双水相萃取操作需在冷却状态下进行


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第8题：

    填空题
    用酚—氯仿抽提DNA时，通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇。这是因为：异戊醇（）。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

    正确答案： 是一种有机试剂，可以降低表面张力，从而减少气泡产生
    解析： 暂无解析

  • 第9题：

    判断题
    提取DNA时，若用酚除蛋白质，需要用Tris-HCl对酚进行平衡，pH达7.8。
    A

    对

    B

    错


    正确答案： 错
    解析： 暂无解析

  • 第10题：

    单选题
    核酸抽提纯化中去除蛋白质的试剂是（）。
    A

    乙醇

    B

    异丙醇

    C

    氯仿

    D

    酚

    E

    酚+氯仿


    正确答案： E
    解析： 暂无解析

  • 第11题：

    单选题
    气相色谱法测定水中五氯酚时，萃取地表水中的五氯酚用。（）
    A

    氯仿

    B

    苯

    C

    正己烷

    D

    石油醚


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

  • 第12题：

    单选题
    测定某一种组织抽提物的蛋白质含量，用什么方法合适（）
    A

    凯氏定氮法

    B

    双缩脲法

    C

    酚试剂法

    D

    紫外分光光度法

    E

    染料结合法


    正确答案： E
    解析： 纯化抗原的鉴定主要是对纯化抗原的含量、理化性质、纯度及免疫活性进行鉴定，常用的方法有酚试剂法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、免疫电泳法、免疫双扩散法等，实际工作中常几种方法联用作纯度鉴定。

  • 第13题：

    用苔黑酚法可以鉴定（）。

    • A、RNA
    • B、DNA
    • C、蛋白质
    • D、所有核酸

    正确答案:A

  • 第14题：

    用酚／氯仿法提取染色体DNA，正确的描述是（）

    • A、酚／氯仿等有机溶剂可使蛋白质变性
    • B、获得的染色体DNA都是完整的分子形式而不是断裂的DNA片段
    • C、释放的DNA是水溶性的
    • D、通常在酚／氯仿中加入少量无水乙醇
    • E、抽提后核酸溶液中的迹量酚不会影响后续的酶切反应

    正确答案:A,B,C

  • 第15题：

    原料油初馏点低时，油品（）升高，为了维持液相抽提，抽提压力应随之（）。


    正确答案:蒸汽压；提高

  • 第16题：

    抽提塔发生混相的原因？如何处理混相？


    正确答案: 抽提塔发生混相的原因是：
    （1）进料组成变化太大，特别是进料中芳烃含量增加时；
    （2）溶剂比太小，使溶剂的选择性下降；
    （3）由于界面计不准，造成长时间未及时调整；
    （4）循环溶剂中含有大量的芳烃，使其选择性下降；
    （5）抽提塔界面上升时，长时间未进行调整或塔底采出量长时间偏小造成的；
    （6）主溶剂温度偏高。
    发生混相后应如下处理：
    （1）适当增加溶剂或使原料趋于平稳。
    （2）当已经发生混相时，应慢慢地增加塔底富溶剂的采出量，•根据进料组成使芳烃尽可能从塔底采出。
    （3）由于富溶剂量不断增加，汽提塔也应及时进行调整。
    （4）发生混相后操作应力求及时、平稳、不能急于求成。
    （5）适当降低主溶剂的温度。

  • 第17题：

    关于温度对双水相萃取的影响，下列正确的是（）。

    • A、在临界点附近，对蛋白质分配系数影响较小
    • B、远离临界点时，对蛋白质分配系数影响较大
    • C、影响双水相黏度和密度，从而影响蛋白质的分配系数
    • D、大规模的双水相萃取操作需在冷却状态下进行

    正确答案:C

  • 第18题：

    在含80%（质量）苯酚的100g水溶液中需要再加多少水，才能使溶液变混浊？（水-苯酚两相平衡时水相含酚16.8%，酚相含水44.9%）。


    正确答案: 当出现两相时，溶液开始变混浊，即：0.832〉H2O%〉0.449
    设再加入水为xg，则[100（1-0.8）+x]/[100（1-0.8）+x+100×0.8]>0.449
    解之，得x>45.2g

  • 第19题：

    问答题
    在 DNA 分离过程中，酚通常与氯仿联合使用，即使不联合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次，为什么？

    正确答案： 原因是酚和水有一定程度的互溶，所以单独使用酚抽提DNA，最终不能除去酚，残留的酚会使起切割和连接作用的限制性内切核酸酶和连接酶变性。氯仿也是蛋白变性剂，它不与水互溶，但是能够同苯酚互溶，这样，酚和氯仿联合使用，就可以带走残留的酚。
    解析： 暂无解析

  • 第20题：

    填空题
    酚是蛋白变性剂，用酚抽提细胞DNA时，具有两方面的作用：(1)________________________(2)______________________。

    正确答案： 蛋白质变性沉淀,抑制DNA酶活性
    解析： 暂无解析

  • 第21题：

    单选题
    去除核蛋白体（DNP）中蛋白质的方法（　　）。
    A

    用苯酚抽提

    B

    用苯酚和氯仿抽提

    C

    用去垢剂使蛋白质变性

    D

    用蛋白酶分解蛋白质去除

    E

    以上全对


    正确答案： D
    解析： 暂无解析

  • 第22题：

    单选题
    用 SDS—酚抽提 DNA时，SDS的浓度是十分重要的，当 SDS 浓度为 0．1％时（）。
    A

    只能将 DNA抽提到水相

    B

    只能将 RNA抽提到水相

    C

    可将DNA、RNA 一起抽提到水相

    D

    DNA和 RNA都不能进入水相


    正确答案： C
    解析： 暂无解析

  • 第23题：

    单选题
    用苔黑酚法可以鉴定（）。
    A

    RNA

    B

    DNA

    C

    蛋白质

    D

    所有核酸


    正确答案： B
    解析： 暂无解析

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