亲和色谱

第1题：

第2题：

分离结构异构体，最适当的选择是（）。

A吸附色谱

B反相离子对色谱

C亲和色谱

D空间排阻色谱

A
略

第3题：

根据色谱机理，色谱柱分为：反相色谱、正相色谱、（）、凝胶过滤色谱（或亲和色谱）。

正确答案:离子交换色谱

第4题：

简述亲和色谱的基本过程。

正确答案: 把具有特异亲和力的一对分子的任何一方作为配基，在不伤害其生物功能情况下，与不溶性载体结合，使之固定化，装入色谱柱，然后把含有目的物质的混合液作为流动相，在有利于固定相配基和目的物质形成络合物的条件下进入色谱柱。目的物质被吸附，杂质直接流出。变换过柱溶液，使配基与其亲和物分离，获纯化的目的产物。

第5题：

亲和膜色谱的原理和特点。

正确答案: 亲和配基固定在膜孔表面，流体在对流透过膜的过程中目标蛋白质与配基接触而被吸附。
亲和膜色谱的优点
无内扩散传质阻力，仅存在表面液膜传质能力，由于传质能力小，吸附速度快，达到吸附平衡所需时间短，配基利用率高；
设备体积小，压降小，流速快，配基用量低；微孔膜介质种类多，价格便宜。

第6题：

亲和色谱的应用有哪些方面？

正确答案: 1.t-PA的纯化—酶的抑制剂为亲和配基
2.干扰素的纯化—免疫亲和色谱
3.脱氢酶的纯化—色素亲和色谱
4.淀粉酶抑制剂的纯化—固定化金属离子亲和色谱
5.基因重组融合蛋白的纯化

第7题：

用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（）

• A、离子交换色谱
• B、亲和色谱
• C、凝胶过滤色谱
• D、反相色谱

正确答案:C

第8题：

亲和色谱中选择理想载体有什么特征？

正确答案: 理想载体的特性：
（1）不溶性；
（2）渗透性，即具有疏松的网状结构，容许大分子自由通过；
（3）高硬度及适当的颗粒形式，最好为均匀的珠状；
（4）最低的吸附力；
（5）较好的化学稳定性；
（6）抗微生物和酶的侵蚀；
（7）亲水性；
（8）具有大量的供反应的化学基团，能与大量配基共价连接。

第9题：

亲和色谱法

正确答案: 将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相，利用与固定相不同程度的亲和性，使成分与杂质分离的色谱法

第10题：

亲和色谱的分离机制是什么？有何特点？

正确答案: 传统的观念认为亲和色谱是基于配基-配体亲和反应的原理，利用色谱的差速迁移理论，实现对目标分子的分离，仅仅是一种组分分离的选择性过滤法。然而，这一理论是建立在配基-配体亲和作用是均相反应和宏观平衡态热力学的基础上的。但是，实际上目标分子在两相间分配系数过大，且在固定相上的吸附等温线多不呈线性。所以，关于生物大分子在亲和色谱中的保留机制及色谱过程数学模型的研究一直是一个相对薄弱的环节，有待进一步的完善.亲和色谱具有较高的专属性，经其分离，纯化，浓集后的生物样品具有较高的纯度，大大降低了后续测定（如HPLC.时的背景噪音，进而使得后续测定具有极高的灵敏度。

第11题：

第12题：

第13题：

样品中各组分的出柱顺序与流动相的性质无关的色谱是（）。

A离子交换色谱

B环湖精色谱

C亲和色谱

D凝胶色谱

D
略

第14题：

色谱按分离原理分（）。

• A、吸附色谱
• B、凝胶色谱
• C、分配色谱
• D、离子交换色谱
• E、生物亲和色谱

正确答案:C,D

第15题：

下列哪种色谱方法是依据分子筛作用来纯化基因工程药物（）。

• A、离子交换色谱
• B、亲和色谱
• C、凝胶色谱
• D、气相色谱

正确答案:C

第16题：

除亲和色谱外，其他亲和分离技术有哪些？

正确答案: 亲和错流过滤、亲和双水相分配、亲和反胶团萃取、亲和沉淀。

第17题：

提高亲和色谱操作容量的方法有哪些？

正确答案: （1）、引入间隔手臂；
（2）、增加配体的取代程度；
（3）、减少配体与基质的结合键。

第18题：

在亲和色谱中经常被采用的生物亲和关系有哪些？

正确答案: ①酶：底物、底物类似物、抑制剂、辅酶、金属离子；
②抗体：抗原、病毒、细胞；
③激素、维生素：受体蛋白、载体蛋白；
④外源凝集素：多糖、糖蛋白、细胞表面受体蛋白、细胞；
⑤核酸：互补碱基链段、组蛋白、核酸聚合酶、核酸结合蛋白；
⑥细胞：细胞表面特异蛋白、外源凝集素。

第19题：

亲和膜色谱的缺点。

正确答案: 从分离效率的角度，因膜的厚度（柱高）很小（一般为10～100μm）.理论板数很低，吸附和清洗效率低。膜的污染和膜孔的堵塞使操作速度、吸附效率和亲和膜的寿命下降。

第20题：

不经过化学修饰或改性的硅胶本身可以做为（）

• A、正相色谱填料；
• B、反相色谱填料；
• C、离子交换色谱填料；
• D、亲和色谱填料；

正确答案:A

第21题：

免疫亲和色谱

正确答案: 一种用于分离、纯化抗原的色谱技术。即将抗体偶联到固相载体而制成免疫亲和层析柱，可对样品中能与抗体结合的特异性抗原分子进行分离、纯化。

第22题：

第23题：