凝胶层析

第1题：

第2题：

第3题：

简述凝胶层析有哪些用途？

正确答案: ①作为分析工具；作为脱盐工具
②生物大分子的浓缩
③除热原物质
④生物大分子的分离纯化；分子量的测定

第4题：

下列哪个不属于高度纯化：（）

• A、层析
• B、吸附法
• C、亲和层析
• D、凝胶层析

正确答案:B

第5题：

下列（）不属于高度纯化

• A、层析
• B、吸附法
• C、亲和层析
• D、凝胶层析

正确答案:B

第6题：

氨基酸的分离（）

• A、离子交换层析
• B、聚酰胺层析
• C、凝胶层析

正确答案:A

第7题：

分离生物碱混合物用（）

• A、大孔吸附树脂层析
• B、聚酰胺吸附层析
• C、离子交换层析
• D、纤维素层析
• E、凝胶层析

正确答案:C

第8题：

简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？

正确答案:离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。b洗脱：增加溶液的离子强度c梯度洗脱法：改变溶液的pHd再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。

第9题：

凝胶层析

正确答案:以各种多孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

下列利用分子筛原理的技术是（）

• A、凝胶过滤
• B、凝胶电泳
• C、阳离子交换层析
• D、阴离子交换层析
• E、透析

正确答案:A

第15题：

分子筛层析指的是（）

• A、吸附层析
• B、分配层析
• C、凝胶过滤
• D、亲和层析

正确答案:C

第16题：

蛋白质分子量的测定可采用（）方法。

• A、离子交换层析
• B、亲和层析
• C、凝胶层析
• D、聚酰胺层析

正确答案:C

第17题：

分子筛层析（凝胶层析）分离纯化蛋白质的原理是什么？

正确答案: 1.分子量大的物质不能进入凝胶粒子内部，随洗脱液从凝胶粒子之间的空隙挤落下来，所以大分子物质迁移速度快；
2.小分子物质要通过凝胶网孔进入凝胶粒子内部，所以小分子物质迁移速度慢。

第18题：

黄酮类化合物的分离多采用（）

• A、离子交换层析
• B、聚酰胺层析
• C、凝胶层析

正确答案:B

第19题：

凝胶过滤层析

正确答案:也叫做分子排阻层析。一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。

第20题：

简述凝胶层析、亲和层析、离子交换层析的原理和操作要点？离子交换层析原理：根据待分离物质带电性质

正确答案:不同的分离纯化方法。
操作：a上样：上样体积不十分严格。
b洗脱：增加溶液的离子强度
c梯度洗脱法：改变溶液的pH
d再生：用0.5mol/LNaOH和0.5mol/LNaCl混合溶液或0.5mol/LHCl处理。
凝胶层析原理：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分阻滞作用的不同。大分子物质不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；小分子物质可自由出入凝胶孔，流程长而后流出层析柱。
操作：
a凝胶的选择和处理，根据相对分子质量范围选择相应型号的凝胶介质。将干胶悬浮于5-10倍的蒸馏水中，充分溶胀，抽气，装柱。
b柱的选择：采用L/D比值高的柱子，可提高分辨率，但影响流速。
c加样：体积不能过多，不超过凝胶床体积的5％，脱盐时可在10％左右。
d洗脱：洗脱液与平衡时用的buffer一致。洗速不可过快，保持恒速。e胶的保存：洗脱完毕后，凝胶柱已恢复到上柱前的状态，不必再生处理。
亲和层析原理：利用生物大分子间特异的亲和力来纯化生物大分子.体通过适当的化学反应共价的连接到载体上，待纯化的物质可被配体吸附，杂质则不被吸附，从层析柱流出，变换洗脱条件，即可将分离的物质洗脱下来，实现分离提纯。

第21题：

第22题：

第23题：

第24题：