简述SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理。

第1题：

第2题：

第3题：

根据抗原分子大小进行纯化分离的方法是（）。

• A、双向免疫扩散
• B、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
• C、酚试剂法
• D、凝胶过滤法

正确答案:D

第4题：

简述聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理。

正确答案: 由于聚丙烯酰胺凝胶是多孔介质，不仅能防止对流，把扩散减少到最低；而且其孔径大小与生物大分子具有相似的数量级，能主动参与生物分子的分离，具有分子筛效应。
因此，在使用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白质分离时，在电泳过程中不仅取决于蛋白质的电荷密度学（电荷效应），还取决于蛋白质的大小（分子量）和形状（分子筛效应）。

第5题：

下列操作常用于测定蛋白质亚基分子量的是（）。

• A、凝胶过滤层析
• B、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
• C、常规聚丙烯酰胺凝胶电泳
• D、琼脂糖凝胶电泳

正确答案:B

第6题：

双向电泳中第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据蛋白质的哪个特点分离的？（）

• A、所带电荷
• B、等电点
• C、分子量
• D、分子形状
• E、分子大小

正确答案:C

第7题：

临床常用的脂蛋白电泳技术是（）

• A、醋酸纤维薄膜电泳
• B、琼脂糖凝胶电泳
• C、转移电泳
• D、等电聚焦电泳
• E、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

正确答案:B

第8题：

根据分子量的不同达到分离纯化蛋白质目的的方法是（）。

• A、凝胶过滤
• B、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
• C、两者均是
• D、两者均否

正确答案:C

第9题：

第10题：

第11题：

第12题：

第13题：

第14题：

第15题：

试述聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。

正确答案: 利用聚丙烯酰胺凝胶作电泳的支持物来分离蛋白质、核酸等大分子化合物的方法称为聚丙烯酰胺凝胶电泳法。聚丙烯酰胺单体（Acr）与交联剂甲叉双丙烯酰胺（Bis）在催化剂过硫酸铵或维生素B₂作用下聚合交联而形成三维网状结构凝胶。在催化过程中同时加入四甲基乙二胺作为加速剂。聚丙烯酰胺凝胶不但可以作为电泳支持物，同时具有分子筛的特点，其分子筛效应的孔径可由不同浓度的凝胶进行控制，因而其分辨率和敏感性都很高。

第16题：

根据支持物不同，电泳可以分为聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳、等速电泳、等电聚焦电泳。

正确答案:错误

第17题：

简述Sanger双脱氧链终止法的基本原理。（聚丙烯酰胺凝胶电泳模式图）

正确答案: （1）核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5’端到3’端聚合（DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程。）；
（2）可延伸的引物必须能提供游离的3’-OH末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3’羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应，则会获得4组长度不同的DNA片段，通过比较所以的DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。

第18题：

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子质量，其原理是什么？

正确答案:SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶性试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。强还原剂，如β-巯基乙醇和二硫苏糖醇则能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，分子被解聚为组成它们的多肽链。解聚后的氨基酸侧链与SDS充分结合形成带负电荷的蛋白质-SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，这就消除了不同分子之间原有的电荷差异。蛋白质-SDS胶束在水溶液中的形状像一个长椭圆棒，椭圆棒的短轴对不同的蛋白质-SDS胶束基本上是相同的。但长轴的长度与亚基分子质量的大小成正比。因此这种胶束在SDS-PAGE系统中的电泳迁移率不再受蛋白质原有电荷的影响，而主要取决于椭圆棒的长轴的长度，即蛋白质或亚基分子质量的大小。

第19题：

根据分子量和电量的不同达到分离纯化蛋白质目的的方法是（）。

• A、凝胶过滤
• B、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
• C、两者均是
• D、两者均否

正确答案:D

第20题：

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

正确答案:在有去污剂十二烷基硫酸钠存在下的聚丙烯酰胺凝胶电泳。SDS-PAGE只是按照分子大小分离的，而不是根据分子所带的电荷和大小分离的。

第21题：

第22题：

第23题：