简述单克隆抗体技术的基本原理。
题目
简述单克隆抗体技术的基本原理。
相似考题
参考答案和解析
正确答案:
1975年，KÖhler和Milstein首创了B淋巴细胞杂交瘤细胞和单克隆抗体技术。其基本原理是：使小鼠免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，每一个杂交瘤是用一个B细胞融合而产生的克隆。这种细胞既保持了骨髓瘤细胞大量无限增殖的特性，又继承了免疫B细胞合成分泌特异性抗体的能力。将这种融合成功的杂交瘤细胞株体外扩增或接种于小鼠腹腔内，则可从上清液或腹水中获得单克隆抗体。用这种方法制备的抗体具有结构高度均一，特异性强，无交叉反应等特点。
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第1题：
简述单克隆抗体的技术。
正确答案:将免疫脾（淋巴）细胞与骨髓瘤细胞在融合剂存在下进行融合，进而进行选择、筛选和克隆的建立等。杂交瘤细胞克隆的后代能在体外培养并合成大量氨基酸顺序相同的单克隆抗体。 -
第2题：
简述PCR技术的基本原理。
正确答案: P.CR技术的基本原理：类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：1）模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
2）模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；3）引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。（Plateau）。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 -
第3题：
简述森林培育学的理论基础，基本原理和技术体系包括哪些？
正确答案: 理论基础：气象学、土壤学、生理学、生态学、遗传学提供了基础理论知识。
基本原理：森林立地、林种规划与树种选择、林分结构、林木生长调控等基本原理。
技术体系：前期规划阶段、更新营造阶段、抚育管理阶段、收获利用阶段。 -
第4题：
简述正弦脉宽调制技术的基本原理？
正确答案: 正弦脉宽调制技术是把正弦波调制成一系列幅值相等，宽度按正弦规律变化的脉冲列，实现的方式有计算法和调制法两种，调制法分为单极型调制和双极型调制。 -
第5题：
简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。
正确答案: 1.亲本细胞的准备（致敏B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备）
2.细胞融合形成杂交瘤细胞
3.杂交瘤细胞的筛选（采用HAT（含有次黄嘌呤（H）、氨基喋呤A.和胸腺嘧啶核苷（T））选择性培养基）
4.可分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞的筛选：对每个含有杂交瘤细胞集落的生长孔中的上清液进行抗体检测，筛选出能够稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交细胞。检测方法：放射免疫测定、酶联免疫技术测定等
5.杂交瘤细胞的克隆化培养：有限稀释法或软琼脂平板法66、最常用的杂交瘤细胞杂交瘤细胞克隆方法有那些？（有限稀释法或软琼脂平板法） -
第6题：
简述二重卷封技术的基本原理。
正确答案: 二重卷封的基本原理是卷封滚轮相对罐的旋转过程中，以罐身（或罐体）与罐盖结合部施加一定的压力，而使其相互卷曲钩合与压紧。
卷封滚轮使罐体与罐盖的周边牢固地紧密钩合而形成五层（罐盖三层、罐体二层）材料卷边。分封边准备、头道轮卷封和二道轮卷封三步。 -
第7题：
单克隆抗体生产的基本原理是什么？
正确答案:B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。 -
第8题：
简述单克隆抗体的主要技术路线。
正确答案: 单克隆抗体的制备：①动物免疫与亲本细胞的选择；②细胞融合：淋巴细胞杂交瘤的制备；③杂交瘤细胞的筛选：有限稀释法等；④单克隆抗体的制备和冻存；⑤单克隆抗体的纯化
亲本细胞的选择：①骨髓瘤细胞：一般不分泌抗体，能在体外无限繁殖和连续继代培养，且为HGPRT－（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）或TK－（胸腺嘧啶核苷激酶）缺陷。多用BALB/C小鼠的骨髓瘤细胞。②淋巴细胞：经过免疫处理的淋巴细胞，多用大鼠或小鼠。③免疫方法：对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内，可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后，注入到动物体内。
细胞融合：将免疫脾细胞和小鼠骨髓细胞以2：1或10：1的比例混匀于50ml锥形离心管内，1200rpm离心；10分钟，尽量吸净上清液，用手指轻击管壁，使管底沉淀的细胞铺展成薄层，在室温条件下边轻轻振摇离心管边在60秒钟内逐滴加入50%的PEG0.5ml，随后静置90秒，再于5分钟内边振摇边逐滴加入5－10ml不含血清的培液或盐水缓冲液，以终止PEG的作用，再静置10分钟。
HAT培养基筛选杂交瘤细胞：细胞团块分散后，加HAT溶液，即可加入有饲养细胞的96孔塑料培养板内每孔0.1ml，用HAT选择性培养时隔4－5天换液，8-10天后可以选择检测。
HAT选择系统：HAT是含一定浓度次黄嘌呤（H）、氨基喋呤A.及胸腺嘧啶核苷（T）的一种选择性培养基，其中三种成分与细胞DNA合成有关。 -
第9题：
简述克隆技术的基本原理。
正确答案: 取某一动物的卵子，将卵子细胞的细胞核取出，再取另一只同类动物的体细胞取其细胞核，将此细胞核移植于卵细胞后使其在体外形成胚胎，再将其移入雌性动物的子宫直至发育成个体的生物技术。 -
第10题：
问答题简述单克隆抗体的主要技术路线。正确答案： 单克隆抗体的制备：①动物免疫与亲本细胞的选择；②细胞融合：淋巴细胞杂交瘤的制备；③杂交瘤细胞的筛选：有限稀释法等；④单克隆抗体的制备和冻存；⑤单克隆抗体的纯化
亲本细胞的选择：①骨髓瘤细胞：一般不分泌抗体，能在体外无限繁殖和连续继代培养，且为HGPRT－（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）或TK－（胸腺嘧啶核苷激酶）缺陷。多用BALB/C小鼠的骨髓瘤细胞。②淋巴细胞：经过免疫处理的淋巴细胞，多用大鼠或小鼠。③免疫方法：对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内，可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后，注入到动物体内。
细胞融合：将免疫脾细胞和小鼠骨髓细胞以2：1或10：1的比例混匀于50ml锥形离心管内，1200rpm离心；10分钟，尽量吸净上清液，用手指轻击管壁，使管底沉淀的细胞铺展成薄层，在室温条件下边轻轻振摇离心管边在60秒钟内逐滴加入50%的PEG0.5ml，随后静置90秒，再于5分钟内边振摇边逐滴加入5－10ml不含血清的培液或盐水缓冲液，以终止PEG的作用，再静置10分钟。
HAT培养基筛选杂交瘤细胞：细胞团块分散后，加HAT溶液，即可加入有饲养细胞的96孔塑料培养板内每孔0.1ml，用HAT选择性培养时隔4－5天换液，8-10天后可以选择检测。
HAT选择系统：HAT是含一定浓度次黄嘌呤（H）、氨基喋呤A.及胸腺嘧啶核苷（T）的一种选择性培养基，其中三种成分与细胞DNA合成有关。解析： 暂无解析 -
第11题：
问答题简述数据加密技术基本原理。正确答案： 在Internet下，互不信任或素不相识的网络用户，可以通过第三方信任机制，实现彼此间安全的信息交换，即可以保证他们彼此间身份可验证、信息可保密、防篡改和抗抵赖。解析： 暂无解析 -
第12题：
简述颌骨牵引延长骨生成技术的基本原理。
正确答案:对于骨组织，牵引延长骨生成是指在牵引力的作用下，在截开骨皮质的骨质之间会产生持续缓慢的作用力，这种作用力（或称张力）会促使骨组织和骨周软组织的再生，从而在牵引的骨段之间的间隙内形成新骨并导致骨周软组织的同步生长。 -
第13题：
快速成型技术主要有哪几种？简述其基本原理。
正确答案: 1、光固化立体造型
2、分层物件制造
3、选择性激光烧结
4、熔融沉积造型
快速成型从零件的CAD几何模型出发，通过软件分层离散和数控成型系统，用激光束或其他方法将材料堆积而形成实体零件。
由于它把复杂的三维制造转化为一系列二维制造的叠加，因而可以在不用模具和工具的条件下生成几乎任意复杂的零部件，极大地提高了生产效率和制造柔性。 -
第14题：
简述储频技术的概念及数字式储频的基本原理。
正确答案: 储频技术是指能够直接将接收到的雷达射频信号的频率储存起来的技术措施。
数字式射频储频基于奈奎斯特取样定理，即：如果用取样频率大于等于两倍信号频率，则该样值通过理想低通滤波器后能单值地恢复原信号。
数字式储频：数字式储频器对输入信号取样、量化（A/D变换），信号频率信息以数字码形式存贮在数字存贮器中。当需要输出信号频率信息时，从数字存贮器中读取数据，经D/A变换和低通滤波器滤波处理，单值恢复原信号。 -
第15题：
简述食品保藏的基本原理与保藏技术的四大类。
正确答案: 维持最低生命活动、抑制微生物活动和酶的活性、运用发酵原理、无菌原理。 -
第16题：
试述淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理？其基本技术步骤要点？单克隆抗体的有哪些应用？
正确答案:（1）杂交瘤技术的基本原理：
①两类细胞
骨髓瘤细胞
可以在体外培养生长，而且比正常细胞生长繁殖快；其可以从患骨髓瘤的小鼠体内获得，不会产生抗体。
脾B淋巴细胞
经抗原致敏分化后会分泌相应单一的均匀的特异性抗体。
②将上两类各具功能的细胞融合在一起，培养成既能产生单一抗体，又能在体外快速生长的杂交瘤细胞。
（2）其基本技术步骤要点：
B.淋巴细胞的制备、骨髓瘤细胞的制备、选择培养基、细胞融合、杂交瘤细胞的选育、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆、单克隆抗体生产。
（3）单克隆抗体的有哪些应用：
①作为亲合层析的配体
②作为生物治疗的导向武器
③作为免疫抑制剂
④在免疫学基础研究方面 -
第17题：
简述DNA改组技术的基本原理和操作。
正确答案:DNA改组技术又称DNA重排技术或有性PCR，指DNA分子的体外重组，是基因在分子水平上进行有性重组。通过用DNase1或者用超声波进行随机切割产生随机大小片段，再从正突变基因库中分离出来所需DNA片段，得到的片段在不加引物的多次PCR循环中，彼此之间互为模板和引物进行扩增，直到连接成为接近目的片段长度的DNA分子，然后再利用基因两端序列为引物扩增获得全长基因，这是来自不同基因之间的重组。 -
第18题：
简述红外测温监测技术的基本原理。红外热成像技术具有哪些特点？
正确答案: 任何物体都存在热辐射，其发射的红外辐射强度能放映物体自身的温度，红外测温技术就是根据捕捉到的红外辐射能量进行物体温度监测的。
特点：非接触测量、可给出分辨率较高的二维图像，可快速和实时测量，全天候。 -
第19题：
简述数据加密技术基本原理。
正确答案:在Internet下，互不信任或素不相识的网络用户，可以通过第三方信任机制，实现彼此间安全的信息交换，即可以保证他们彼此间身份可验证、信息可保密、防篡改和抗抵赖。 -
第20题：
问答题简述生物传感器耦联质谱技术的基本原理。正确答案： 生物传感器耦联质谱技术是定性和定量检测蛋白质间相互作用并对其进行鉴定的简便而快速的方法。它是以表面等离子共振（SPR）为基础的生物大分子相互作用的分析技术（BIA）与MALDI-TOF质谱技术的有机结合，其原理是采用1cm*1cm大小的生物传感芯片，该芯片以金黄色的玻璃作为支持物，上面结合有羧甲基葡聚糖聚合物，通过化学修饰可将感兴趣的蛋白质（肽）固定在葡聚糖聚合物上形成传感片，将待测蛋白质或肽溶液通过微射流卡盘流过该固相载体，那些与固相蛋白质（肽）发生相互作用的蛋白质（肽）被滞留在聚合物的表面上，由于芯片表面蛋白质含量增加从而导致入射光的折射率改变，使其表面等离子共振光的共振角发生改变，该改变与表面蛋白的含量呈线性关系，通过SPR-BIA检测系统可实时检测该变化从而实现对蛋白质间相互作用的分析。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题简述红外测温监测技术的基本原理。红外热成像技术具有哪些特点？正确答案： 任何物体都存在热辐射，其发射的红外辐射强度能放映物体自身的温度，红外测温技术就是根据捕捉到的红外辐射能量进行物体温度监测的。
特点：非接触测量、可给出分辨率较高的二维图像，可快速和实时测量，全天候。解析： 暂无解析 -
第22题：
问答题简述共振解调技术的基本原理和作用。正确答案： 共振解调法也称包络检波频谱分析法，是目前滚动轴承故障诊断中最常用的方法之一。
原理：利用轴承故障所激发的轴承元件固有频率的振动信号，经加速度传感器的共振放大，带通滤波及包络检波等信号处理，保留检波后的波形，再用频谱分析法找出故障信号的特征频率，以确定轴承的故障元件。其过程可概括为共振响应、包络解调、频谱分析3个步骤。
作用：信号经过共振放大和包络检波处理后，与原始脉冲波比较，振幅得到放大，波形在时域上得到展宽，不再是一个包含频率无线多的尖脉冲。而且包络波的低阶频率成分所具有的能量较原始脉冲波的低阶频率成分的能量有了极大增强，所以最终获得的故障信号信噪比，比原始信号提高了几个数量级。其作用主要是提高低频故障信号的信噪比，便于识别和判断轴承故障。解析： 暂无解析