简述深冻植物细胞复苏后测其生命活力与存活率的三种方法。
题目
简述深冻植物细胞复苏后测其生命活力与存活率的三种方法。
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第1题：
简述复苏后的生命支持与监护。
正确答案: （1）维持循环稳定，保持血压在正常范围。
（2）脑复苏包括：降温治疗，利尿，促进脑细胞恢复，维持电解质及酸碱平衡等。
（3）高压氧治疗。
（4）使用机械通气辅助呼吸。 -
第2题：
不适合有细胞结构的植物性原料贮存方法的是（）。
- A、冷藏
- B、缓冻
- C、速冻
- D、室温
正确答案:B -
第3题：
细胞冻存跟复苏的基本原则是（）
- A、快冻快融
- B、慢冻快融
- C、快冻慢融
- D、慢冻慢融
正确答案:B -
第4题：
按移植物是否保持活力，对保持活力，移植后能恢复其（），称（）。
正确答案:原有功能者；活体移植 -
第5题：
动物细胞冻存和复苏的原则是什么？
正确答案: 慢冻快融。 -
第6题：
下列关于细胞冻存及复苏过程的描述错误的是（）
- A、细胞冻存的原则为快速冻存
- B、冻存液中含有8％二甲基亚砜
- C、每只冻存管中以冻存（1～1.5）×105个细胞为宜
- D、冻存的细胞提前一天换全培养液
- E、复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42℃温水中速溶
正确答案:A -
第7题：
单选题细胞冻存跟复苏的基本原则是（）A快冻快融
B慢冻快融
C快冻慢融
D慢冻慢融
正确答案： D解析： 暂无解析 -
第8题：
问答题简述细胞冻存、复苏和运送的方法。正确答案： （1）细胞冻存方法：预先配制冻存液（含20%血清培养基、10%DMSO）；取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入新鲜培养液，低速离心5分钟；弃上清液，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液，分装至冻存管中。密封后标记冻存细胞名称，日期，细胞状态也可标记，冻存者姓名。（细胞冻存是慢冻的过程：4℃1小时，-20℃1小时，-80℃过夜，液氮中保存）
（2）细胞复苏方法（快融）：从液氮中取出冷冻管，迅速投入37～38℃水浴中，使其融化（1分钟左右）。5分钟内用培养液稀释至原体积的10倍以上。低速离心10分钟。去上清，加新鲜培养液培养刚复苏的细胞。
（3）细胞运送方法：
①冻存运送：液氮中；
②充液法：细胞传代后贴壁，瓶内充满培养液，密闭封口，保温携带。解析： 暂无解析 -
第9题：
填空题按移植物是否保持活力，对保持活力，移植后能恢复其（），称（）。正确答案： 原有功能者,活体移植解析： 暂无解析 -
第10题：
单选题下列关于细胞冻存及复苏过程的描述错误的是（）A细胞冻存的原则为快速冻存
B冻存液中含有8％二甲基亚砜
C每只冻存管中以冻存（1～1.5）×105个细胞为宜
D冻存的细胞提前一天换全培养液
E复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42℃温水中速溶
正确答案： A解析： 冻存细胞时，要注意缓慢逐步降温。先将细胞悬液加入冻存管，封好口，冰水浴置-20℃冰箱过夜，次日转入-80℃冰箱，24～48小时后再转入液氮罐中。 -
第11题：
填空题移植物保持活力，移植后能恢复其原有功能者，称（）；移植物已失去活力或经过人工处理灭活，保留其外形，称为（）。正确答案： 活体移植,结构移植解析： 暂无解析 -
第12题：
简述精子存活率的检查方法。
正确答案: 采取的新鲜精液经镜检后，按1：2~1：3倍稀释，然后取出10ml分装于两支试管内，用软木塞塞好，再用棉花纱布包好，放在0摄氏度~5摄氏度的冰箱中，使其逐渐降温。然后每隔8~12h取样在35摄氏度~38摄氏度条件下检查，直至精子无直线运动为止。最后计算总存活时间和生存指数。 -
第13题：
简述细胞活力鉴定的方法。
正确答案: 1、相差显微镜观察法
2、FDA染色法
3、伊凡蓝染色法 -
第14题：
液氮保存和复苏细胞的基本原则是（）
- A、快冻快溶
- B、慢冻慢溶
- C、慢冻快溶
- D、快冻慢溶
- E、自然溶冻
正确答案:C -
第15题：
移植物保持活力，移植后能恢复其原有功能者，称（）；移植物已失去活力或经过人工处理灭活，保留其外形，称为（）。
正确答案:活体移植；结构移植 -
第16题：
植物的抗冻性与细胞的硫氢基含量高低成（）关系。
正确答案:正比例 -
第17题：
问答题简述基本生命支持(B1S)的程序中心肺复苏前的操作内容及方法。正确答案： 基本生命支持(BLS)的程序中心肺复苏前的操作内容及方法：
(1)判断患者反应：在判定事发地点易于就地抢救后，急救人员在患者身旁快速判断有无损伤，是否有反应。
(2)启动急救医疗服务系统：通过拨打当地的急救电话启动急救医疗服务系统。
(3)气道：如果患者无反应，急救人员应判断患者有无呼吸或通气是否充分，应使患者取仰卧位，并打开气道。
(4)患者的体位：为实施CPR，判断复苏效果，须使患者仰卧在坚固的平(地)面上，如果患者面朝下时，应把患者整体翻转，即头、肩、躯干同时转动，避免躯干扭曲，头、颈部应与躯干始终保持在同一个轴面上，将双上肢放置身体两侧。
(5)急救者的位置：经过训练的急救者应位于患者一侧，或两人分为两侧。
(6)开放气道：如无颈部创伤，可以采用仰头抬颏法，即把一只手放在患者前额，用手掌把额头用力向后推，使头部向后仰，另一只手的手指放在下颏骨处，向上抬颏，使牙关紧闭，下颏向上抬动，并清除患者口中的异物和呕吐物；对于怀疑有头、颈部创伤患者，可以采用托颌法，即把手放置在患者头部两侧，肘部支撑在患者躺的平面上，握紧下颌角，用力向上托下颌。解析： 暂无解析 -
第18题：
填空题植物的抗冻性与细胞的硫氢基含量高低成（）关系。正确答案： 正比例解析： 暂无解析 -
第19题：
单选题液氮保存和复苏细胞的基本原则是（）A快冻快溶
B慢冻慢溶
C慢冻快溶
D快冻慢溶
E自然溶冻
正确答案： D解析： 暂无解析 -
第20题：
问答题简述深冻植物细胞复苏后测其生命活力与存活率的三种方法。正确答案： （1）再培养法：将复苏后细胞立即接种于新鲜培养基上再培养，同时测定细胞增殖量，愈伤组织形成情况及人化为新植株能力；
（2）二醋酸光素染色法：用1滴0.1%荧光素染料溶液与一滴化冻后细胞悬浮液混合，活细胞染色，死细胞不着色，用普通显微镜观察计数得细胞总数，用紫外光显微镜观计数得活细胞数，据此可计算出冻存细胞存活率；
（3）TTC法：根据活细胞内脱氢酶可将氯化三苯四氮唑还原为formazam，后者溶于乙醇而不溶于水，故前者与冻细胞保温反应用乙醇抽提，再用分光光度法测定吸收度，用以判断细胞存活率及生活力。解析： 暂无解析 -
第21题：
问答题简述细胞冻存与复苏要点与注意事项。正确答案： 细胞冻存要点
（1）冷冻过程要缓慢.需要冷冻保存的细胞先在4℃冰箱中放置30-60分钟；然后转入-20℃，放置30分钟；然后再转入-80℃放置16-18小时（或过夜）；最后放入液氮中长期保存.有条件的地方，可用程控降温仪，按每分钟-1到-3℃速度降温，一直到-80℃以下，然后直接放入液氮中长期保存.
（2）冻存细胞必须处在对数生长期，活力大于90%，无微生物污染.
（3）细胞浓度控制在：1×107-5×107/ml.
（4）使用高浓度血清或蛋白保护剂.一般情况下，用于冷冻保存完全细胞生长培养液中血清浓度大于20%.
（5）使用合适的细胞冷冻保护剂，以保护细胞在冷冻过程中免受冰晶破坏.目前，最常用的冷冻保护剂是DMSO（二甲基亚砜），使用终浓度为5-10%.但是，有些细胞系不能用DMSO作为冷冻保护剂，如人白血病细胞系HL-60.因为，DMSO能诱导HL-60细胞分化.在这种情况下，可选用其它冷冻保护剂，如甘油（glycele），羟乙基淀粉等.
注意事项
（1）细胞在冷冻过程中在-20℃冰箱内放置时间不可超过1小时，以防止冰晶过大而破坏细胞.也可跳过-20℃这一步骤直接放入-80℃冰箱中，但这样做细胞存活率要低一些.
（2）DMSO稀释时会释放大量热量.因此，DMSO不能直接加到细胞液中，必须事先配制.
（3）DMSO必须是细胞培养级别的.新买的DMSO本身处于无菌状态，第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管或瓶中，4℃保存.避免反复冻融造成DMSO裂解产生有害物质.并可减少污染机会.如要过滤DMSO，必须选用耐DMSO的尼龙滤膜.细胞冷冻保存液主要成分：冷冻保护剂，基础培养液，血清或蛋白.解析： 暂无解析